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【ACS Catal.】PET水解酶表面引入正电荷有利于PET的结合和降解

聚对苯二甲酸乙二酯(PET)产量巨大,广泛应用于饮料瓶、服装和包装材料中。PET可形成物理和化学稳定的结晶结构,被归类为工程塑料。由于其稳定性,PET在环境中长期存在。由于PET是一种不溶于水的合成聚合物,其酶降解是发生在固/液界面的非均相反应。

图片来源:ACS Catal.


近期,日本国家自然科学研究院分子科学研究所Ryota Iino组在一个元基因组文库中发现耐热酶PET2,并将其改造以提高其对PET的水解活性。PET2野生型(WT)的Tm69.0°C,并以0.40 min−1的速率生成水溶性产物。


图片来源:ACS Catal.


为了提高PET2水解效率,将用于表面电荷修饰、骨架稳定和额外二硫键形成的突变位点引入到PET2 WT中,最佳突变(PET2 7M)的Tm75.7℃,水解活性为1.3 min−1

图片来源:ACS Catal.


PET2突变体的晶体结构表明,引入的精氨酸和赖氨酸残基定向于溶剂,类似于来自Ideonella sakaiensis 201-F6PET水解酶。单分子荧光成像显示,这些带正电的表面残基使PET2 7MPET表面的结合速率常数比PET2 WT增加了2.7倍,并导致更高的活性。PET2 7M水解非晶态PET最适温度比PET2 WT8℃,并且在最适温度下PET27M的水解活性比PET2 WT6.8倍。此外,PET2 7M68℃下以恒定速率生成反应产物至少24小时,表明在最佳温度下具有长期热稳定性。

图片来源:ACS Catal.


参考文献:Positive Charge Introduction on the Surface of Thermostabilized PET Hydrolase Facilitates PET Binding and Degradation

ACS Catal. 2021, 11, 8550−8564

原文作者:Akihiko Nakamura,* Naoya Kobayashi, Nobuyasu Koga, and Ryota Iino*


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