分享一篇发表在ACS Chemical Biology上的文章，题目为“High-Throughput Screening Tool to Identify Small Molecule Inhibitors of Telomerase”，通讯作者是来自哈佛医学院的Matthew Meyerson教授，他主要利用基因组学手段研究人类癌症。这篇文章中作者报道了针对端粒酶的核苷酸高通量筛选方法，鉴定了2种对端粒酶具有抑制活性的化合物，可能用于进一步的药物发现。

端粒逆转录酶TERT是一种核糖-蛋白复合物，它能在快速分裂的细胞中复制以维持端粒长度，实现细胞永生，因此端粒酶被认为是重要的癌症靶点，但是迄今为止还没有小分子抑制剂被批准作为抗癌疗法。因此，作者希望使用基于核苷酸的荧光高通量方法对端粒酶的小分子抑制剂进行筛选。该技术的原理是，在端粒酶酶促循环中，将结合并消耗dNTP，偶联荧光染料BBT的dNTP被水解后可以产生BBT-PPi，被碱性磷酸酶识别产生可测量的信号。

作者首先进行了预实验，验证了端粒酶可以行使功能扩增核酸链，且对BBT-dGTP有结合力。

然后，作者使用一个含约3600个化合物的库进行筛选。其中8种化合物表现出较为可靠的信号。

对这些化合物进行了引物延伸测定，发现其中3种能显著抑制引物延伸。

由于其中一种剩余量不足以继续实验，因此仅对剩余两种进行分析。其结构式展示如下，分别测试其IC50值为143和95uM。

总之，这篇文章中作者使用带有化学修饰的核苷酸高通量荧光筛选法鉴定了端粒酶的抑制剂，在约3600个化合物的库中找到2个潜在的抑制剂，为进一步的药物发现和癌症治疗奠定了基础。

本文作者：WYJ

责任编辑：LYC

DOI：10.1021/acschembio.5c00244

原文链接：https://doi.org/10.1021/acschembio.5c00244